
INHALTSVERZEICHNIS 8
5.7.2 BLOTTEN VON PROTEINEN UND N-TERMINALE PROTEINSEQUENZIERUNG __________________129
5.7.3 B
ESTIMMUNG DER PROTEINKONZENTRATION________________________________________130
5.8 PROTEINREINIGUNG______________________________________________131
5.8.1 REINIGUNG DER ROL AUS PICHIA PASTORIS IN SYNTHETISCHEM UND KOMPLEXEM MEDIUM____131
5.8.1.1 Konzentrierung der Überstände und Dialyse ________________________________________131
5.8.1.2 Ionenaustauschchromatographie mit SP-Sepharose___________________________________131
5.8.1.3 Hydrophobic Interaction Chromatography mit Phenyl- und Butylsepharose _______________131
5.9 BESTIMMUNG DER BINDUNGSEIGENSCHAFTEN VON PEPTIDSEQUENZEN AUS
DER
ZUFALLSMUTAGENESE ________________________________________132
5.9.1 METALLAFFINITÄTSCHROMATOGRAPHIE (ION METAL AFFINITY CHROMATOGRAPHY, IMAC) __133
5.10 AKTIVITÄTSTESTS _______________________________________________133
5.10.1 LIPASE ASSAYS_______________________________________________________________133
5.10.1.1 pH-Stat Assay________________________________________________________________133
5.10.1.2 pNPP-Schnelltest _____________________________________________________________134
5.10.2 F
LUORESZENZ ASSAY __________________________________________________________134
6LITERATUR ___________________________________________135
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